《土壤和环境微生物学》——硝化细菌在土壤中的数量和分布

对土壤中硝化菌的种类和数量分布的报道与所采用的分析方法有重大关系。有些方法未能反应自然界实际情况。首先从分离放大而论，常用的加富培养的方法是有缺点的。常使某一个菌株群体增加，而压倒其他，Schmidt等不用加富培养，直接从MPN法的正反应管中转移至稀释分离系列的液体培养中进行分离。这方法有可能从既定的不同数量的硝化菌群体中得到分离物。

关于MPN计数法因为培养基成分和培养时间不同，也可能造成很大差异，Schmid曾用荧光抗体法对MPN法比较。他们用了三个已知亚硝酸菌和三个培养基。这三个培养基是 Alexander 等的。 Walker等的和Matulewich等的，

Walker的培养基要求最短培养时间，平均3.1周，其平均最大数量相当荧光体抗体法94%；Walker的培养基平均培养时间4.2周，数量和前者相近；而Alexander的培养基平均培养6.1周，得到最大数也只相当荧光法的61%，如果按该作者原规定的培养3周，则只达荧光法的3.7%。所以测数时应注意选择方法。

关于土壤亚硝酸菌属的分布，Walker从1960年起，从世界各地收集的土壤分离物，40个分离物中17个为亚硝化细菌，11个为亚硝化螺菌，7个为亚硝化单细胞，1个为亚硝化弧菌，还有4个未鉴定。他注意到在农业土壤中亚硝化叶菌为优势菌，而不是亚硝化单胞菌。而Schmidt从一个土壤中分离到三个属，但他却认为该土壤中亚硝化单胞菌和亚硝化螺菌比亚硝化叶菌普遍，硝化细菌在土壤中类型似乎比较有限，Fliermans 用活跃硝化杆菌和维氏硝化杆菌制备的荧光抗体从对土壤中分离到自然硝酸细菌的培养进行检测，他认为土壤中硝酸细菌就局限在这两个种，但Schmidt不同意这种看法，他认为这种局限性很可能是加富培养方法造成的。他不用加富培养得到的硝酸细菌至少5个另外的血清型。

硝化菌的生长是缓慢的，即令在实验室的纯培养，亚硝酸细菌的代时为12-20h，硝化细菌的代时在8-16h的范围。在土壤中则代时更长得多，见表11-2。

表11-2中的细胞产量相当低，比纯培养中约低100倍，而土壤部分消毒后再按种培养的细胞产量则和培养数近似，这说明在自然界土壤中有一系列因素影响硝酸细菌生长，其中重要的可能是生物因素。