《土壤微生物生态工程》—测定生长繁殖的方法（14）

1.测生长量

测定生长量的方法很多，包括直接法和间接法。干重法就是典型的直接测生受量方法。间接法包括比浊法和生理指标法。

2.计繁殖数

(1)直接法指用计数板（例如血球计数板） 在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。此法十分常用，但得到的数目是包括死细胞在内的总菌数。为解决这一矛盾，已有用特殊染料作活菌染色后再用光学显微镜计数的方法，例如用美蓝液对酵母菌染色后，其活细胞为无色，而死细胞则为蓝色，故可作分别计数；又如，细菌经吖啶橙染色后，在紫外光显微镜下可观察到活细胞发出橙色荧光，而死细胞则发出绿色荧光，因而可作活菌和总菌计数。

(2)间接法    是一种活菌计数法。这是一种依据活菌在液体培养基中会使其变混或在固体培养基上（内）形成菌落的原理而设计的。

例如平板菌落计数法就是基于每一个分散的活细胞在适宜的培养基中具有生长繁殖并能形成一个菌落的能力；因此，菌落数就是待测样品所含的活菌数。分解代谢与合成代谢两者联系紧密，互不可分。连接分解与合成代谢的一些重要中间代谢物一共有12种，如果在生物体中只进行能量代谢，则有机能源的最终结局只是产生ATP、H2O和CO2，这时便没有任何中间代谢物可供累积，因此，合成代谢也不可能正常进行。相反，如果要进行正常的合成代谢，又须抽走大量为分解代谢正常进行所必需的中间代谢物，结果也势必影响具有循环机制的分解代谢的正常运转。微生物和其他生物在它们的长期进化过程中，通过两用代谢途径和代谢回补顺序的方式，早已巧妙又圆满地解决了这个问题。